期刊简介

               本刊重点刊登国内外有关蛇类科学与生物毒素的开发与利用,医学基础、临床的研究与实践,微循环研究,亚健康防治,健康养生等生命科学最新科技信息,并用一定版面介绍蛇类养殖与利用,供求信息等内容。                

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  • 杂志名称:蛇志杂志
  • 主管单位:广西区科学技术协会
  • 主办单位:中国蛇协
  • 国际刊号:1001-5639
  • 国内刊号:45-1168/R
  • 出版周期:季刊
期刊荣誉:2000年荣获执行《CAJ-CD规范》优秀奖期刊收录:知网收录(中), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 上海图书馆馆藏
蛇志杂志2016年第02期

间接ELISA法在注射用矛头蝮蛇血凝酶蛇毒种属鉴别中的应用

李秀娜;孙东;李秀琳;崔亮亮;丁忠福;宁静

关键词:矛头蝮蛇血凝酶, 巴曲亭, 酶联免疫吸附法, 种属特异性
摘要:目的 建立间接ELISA法定性检测矛头蝮蛇血凝酶,用于巴曲亭蛇毒种属来源检测.方法 将矛头蝮蛇血凝酶为抗原免疫小鼠,与尖吻蝮蛇血凝酶、白眉蝮蛇血凝酶交叉筛选获得特异性单克隆抗体.优化矛头蝮蛇血凝酶单抗(一抗)、HRP标记的羊抗鼠(二抗)IgG、矛头蝮蛇血凝酶(抗原)工作浓度,建立间接ELISA检测方法.考察方法的重复性、中间精密度,确定方法的适用性.采用膜超滤法将巴曲亭中辅料去除,按照建立的ELISA法检测,判定种属来源.结果 矛头蝮蛇血凝酶单抗具有强特异性,一抗的佳工作浓度1∶4000(250 ng),二抗的佳工作浓度1∶4000(250 ng),抗原浓度2μg/孔,该法重复性和中间精密度较好.巴曲亭与矛头蝮蛇血凝酶单抗有特异性反应,与其它蛇毒来源血凝酶单抗无交叉反应,确定巴曲亭来源于矛头蝮蛇蛇毒.结论 本研究建立的ELISA法具有较好的特异性,可作为巴曲亭蛇毒种属来源判断的方法.