期刊简介
本刊重点刊登国内外有关蛇类科学与生物毒素的开发与利用,医学基础、临床的研究与实践,微循环研究,亚健康防治,健康养生等生命科学最新科技信息,并用一定版面介绍蛇类养殖与利用,供求信息等内容。
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- 杂志名称:蛇志杂志
- 主管单位:广西区科学技术协会
- 主办单位:中国蛇协
- 国际刊号:1001-5639
- 国内刊号:45-1168/R
- 出版周期:季刊
期刊荣誉:2000年荣获执行《CAJ-CD规范》优秀奖期刊收录:知网收录(中), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 上海图书馆馆藏
广西眼镜蛇蛇毒磷脂酶A2的分离纯化及其对HSC-T6细胞的作用
付道莹;张学荣;付娆;张可星;侯瑞雪;班建东;农君;陈缨
关键词:磷脂酶A2, 分离纯化, CCK-8, 肝星状细胞
摘要:目的:对广西眼镜蛇毒中磷脂酶 A2(PLA2)进行分离纯化,测定其对肝星状细胞 HSC‐T6的增殖抑制作用。方法采用Sephadex G‐50凝胶层析柱、CM‐Sepharose CL‐6B 离子交换柱、Macro‐prep High S 预装柱结合的方法分离广西眼镜蛇粗毒,经平板法测定各峰的PLA2活性;经SDS‐PAGE 电泳鉴定终产物纯度并测定分子量,NanoLC‐ESI‐MS/MS 鉴定其组分;CCK‐8法测定PLA2对肝星状细胞(HSC‐T6)的增殖抑制作用,确定其凋亡的小毒性浓度。结果 Sephadex G‐50凝胶层析柱、CM‐Sepharose CL‐6B 离子交换柱、Macro‐prep High S 预装柱层析法,得到第Ⅲ峰具PLA2活性,且达到电泳纯,经NanoLCESI‐MS/MS 鉴定其为PLA2,分子量约为14.06 kD ;PLA2在0~1μg/ml 的浓度下对HSC‐T6细胞具有一定的促增殖作用,2μg/ml 时细胞数达到大值,4~16μg/ml 时对细胞生长有抑制作用,且随浓度增大细胞数降低。结论采用Sephadex G‐50、CM‐Sepharose CL‐6B 、Macro‐prep High S 预装柱结合的方法对广西眼镜蛇毒进行分离纯化,得到电泳纯且具PLA2活性的磷脂酶A2;广西眼镜蛇毒PLA2对肝星状细胞HSC‐T6增殖有抑制作用,PLA2对HSC‐T6细胞的小毒性浓度为2μg/ml 。
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