期刊简介
本刊重点刊登国内外有关蛇类科学与生物毒素的开发与利用，医学基础、临床的研究与实践，微循环研究，亚健康防治，健康养生等生命科学最新科技信息，并用一定版面介绍蛇类养殖与利用，供求信息等内容。
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- 杂志名称：蛇志杂志
- 主管单位：广西区科学技术协会
- 主办单位：中国蛇协
- 国际刊号：1001-5639
- 国内刊号：45-1168/R
- 出版周期：季刊
期刊荣誉：2000年荣获执行《CAJ-CD规范》优秀奖期刊收录：知网收录(中), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 上海图书馆馆藏
应用SYBR荧光实时定量RT-PCR法检测BMSCs诱导大鼠肝星状细胞中DR5mRNA表达
杨文；覃山羽；姜海行；张君红；宁琳；孟云超
关键词：骨髓间充质干细胞, 肝星状细胞, DR5, 凋亡, 荧光实时定量RT-PCR
摘要：目的 应用SYBR荧光实时定量RT-PCR法检测骨髓间充质干细胞(BMSCs)对大鼠肝星状细胞(HSCs)的死亡受体5(DR5)mRNA表达的影响,探讨BMSCs诱导HSCs凋亡及其机制.方法 采用贴壁筛选法培养、纯化SD大鼠BMSCs,传至第4代使用;大鼠原代HSCs细胞及肝纤维原细胞系冻融后传代使用.应用6孔塑料培养板,建立上下双层细胞共培养体系,常规培养.实验分为3组:(1)实验组:BMSCs与HSCs共培养;(2)空白对照组:HSCs单独培养;(3)阴性对照组:大鼠肝纤维原细胞与HSCs共培养.以上培养体系动态观察24、48、72 h,应用流式细胞仪检测HSCs细胞凋亡率,采用SYBR Green I荧光实时定量RT-PCR法检测,以β-actin基因作为内参,计算各组DR5 mRNA的相对表达量.结果 在共培养组中,BMSCs促进了HSCs凋亡,与其他两组比较差异有显著统计学意义(P<0.01),空白对照组与阴性对照组比较无统计学意义(P>0.05).实验组BMSCs能明显上调HSCs中DR5 mRNA的表达,与空白对照组和阴性对照组比较差异有显著统计学意义(P<0.01);空白对照组与阴性对照组DR5 mRNA的表达比较无统计学意义(P>0.05).结论 利用SYBR荧光实时定量RT-PCR法检测BMSCs诱导大鼠肝星状细胞中DR5 mRNA表达,为进一步研究BMSCs通过死亡受体途径调控HSCs凋亡以及为BMSCs用于治疗肝纤维化的机制研究提供了理论基础.
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