期刊简介

               本刊重点刊登国内外有关蛇类科学与生物毒素的开发与利用,医学基础、临床的研究与实践,微循环研究,亚健康防治,健康养生等生命科学最新科技信息,并用一定版面介绍蛇类养殖与利用,供求信息等内容。                

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  • 杂志名称:蛇志杂志
  • 主管单位:广西区科学技术协会
  • 主办单位:中国蛇协
  • 国际刊号:1001-5639
  • 国内刊号:45-1168/R
  • 出版周期:季刊
期刊荣誉:2000年荣获执行《CAJ-CD规范》优秀奖期刊收录:知网收录(中), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 上海图书馆馆藏
蛇志杂志2009年第01期

巴曲酶在毕赤酵母中的高效表达

薛雁;徐梅;薛百忠;王宏英;兰海英

关键词:重组巴曲酶, 类凝血酶, 巴斯德毕赤酵母, 偏好密码子
摘要:目的 研究巴曲酶在毕赤酵母菌中的表达.方法 按Pichia pastoris偏好密码子人工合成巴曲酶全基因,克隆到酵母分泌型表达载体pPICZαA中,将重组载体酶切线性化后经电转化转入X-33,筛选鉴定转化子,经摇瓶发酵甲醇诱导,酵母菌分泌表达有凝血活性的巴曲酶.经SDS-PAGE电泳确定其分子量为33.0 kDa,免疫印迹证明重组巴曲酶具有天然巴曲酶的免疫活性.结果 经发酵条件的优化,发酵罐的表达量达到25000 Ku/L发酵液,从每升发酵液中可纯化出11.0 mg重组巴曲酶.结论 巴曲酶毕氏酵母菌成功的构建,为重组巴曲酶止血药的开发奠定了基础.